HbA1c假性降低？可能是這6個原因
發(fā)布時間：2024-05-27
糖化血紅蛋白是指血中的葡萄糖與血紅蛋白β鏈N-末端纈氨酸殘基縮合而成的化合物，占成人血紅蛋白5%~8%，主要包括 HbA1a、HbA1b、HbA1c，其中HbA1c 約占糖化血紅蛋白的80%且濃度相對穩(wěn)定。因此，臨床上常以HbA1c代表總的糖化血紅蛋白水平。
圖1 血紅蛋白的組分及含量
糖化血紅蛋白和紅細胞的壽命一樣，紅細胞的壽命約為120天，因此，糖化血紅蛋白可反映過去8~12周體內(nèi)血糖的平均水平，而與患者是否空腹、晝夜節(jié)律等因素?zé)o關(guān)。糖化血紅蛋白結(jié)果以百分數(shù)表示，正常值為4%~6%（說明：2023 年美國 ADA 糖尿病診療指南提出 HbA1c ≥ 5.7% 診斷糖耐量異常或糖尿病前期階段）。
HbA1c被認為是血糖長期水平監(jiān)測和控制的金標(biāo)準(zhǔn)，在實際臨床檢測中時常會出現(xiàn)HbA1c假性減低的現(xiàn)象，這不僅干擾了臨床診療，也導(dǎo)致檢驗服務(wù)臨床的質(zhì)量大打折扣。
那么，我們?nèi)绾位鹧劢鹁Φ淖R別出HbA1c假性減低呢？
HbA1c是血紅蛋白與葡萄糖的結(jié)合產(chǎn)物，因此，任何引起血紅蛋白數(shù)量與質(zhì)量變化的因素都會對HbA1c結(jié)果產(chǎn)生影響。干擾因素包括：血紅蛋白變異體、紅細胞壽命縮短或周轉(zhuǎn)加快、糖化速率降低等。
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血紅蛋白變異體是由于Hb氨基酸序列的改變造成的，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的血紅蛋白變異體種類超過1000種，但是僅有不到1/3的血紅蛋白變異體會出現(xiàn)臨床癥狀，如非缺鐵性的小細胞低色素性貧血、慢性貧血、黃疸等。
目前實驗室應(yīng)用最廣泛HbA1c檢測方法是離子交換高效液相色譜法（HPLC），其方法操作方便、結(jié)果準(zhǔn)確、快速，但此方法易受血紅蛋白變異體的干擾。HPLC 的原理是根據(jù)HbA1c所帶電荷與其他蛋白之間的差異而將其分離，再根據(jù)峰值下面積來計算HbA1c占總HbA的比例（圖2）。
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圖2 HbA1c升高的糖尿病患者樣品中的 HPLC 峰
檢測儀器：雷諾華科技 LD-600全自動糖化血紅蛋白分析儀
當(dāng)存在不同的血紅蛋白變異體時，血紅蛋白變異體不能有效地與HbA0、HbA1c分離，從而導(dǎo)致HbA1c結(jié)果異常升高或降低。
有研究表明，較常見的異常血紅蛋白如 HbF（<10%）一般不影響 HbA1c 的檢測，但高效液相色譜法不能將其他異常血紅蛋白變異體（如HbS）分辨出來，從而影響HbA1或HbA0峰的面積與高度，會導(dǎo)致HbA1c結(jié)果假性升高或假性降低。
為了減少變異體對HbA1c結(jié)果產(chǎn)生影響，可啟用高效液相色譜法儀器的變異模式測試，雷諾華公司的LD-600、LD-560型全自動糖化血紅蛋白分析儀均有變異模式，該模式下，可有效分離糖化血紅蛋白常見變異體如HbC、HbD、HbE、HbS、HbA2 等（圖3），從而確保HbA1c結(jié)果準(zhǔn)確。
檢測儀器：雷諾華科技 LD-600全自動糖化血紅蛋白分析儀
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任何能縮短紅細胞壽命或增加紅細胞周轉(zhuǎn)速率（減少紅細胞暴露于血糖的時間）的因素均可造成 HbA1c水平假性降低，例如急性或慢性失血、溶血性貧血、脾臟腫大等。
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維生素C和維生素E會影響血紅蛋白的糖化速率從而造成HbA1c假性降低。維生素E每天劑量達到600~1200mg即可減少蛋白質(zhì)的糖化作用，因此長期大劑量服用維生素C或維生素E會造成HbA1c假性降低。
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HbA1c的生物合成中，首先是血紅蛋白β亞基N端的纈氨酸的氨基與葡萄糖的自由醛基可逆縮合為醛亞胺（席夫堿），而后醛亞胺發(fā)生糖基化分子重排，形成具有穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的糖基化產(chǎn)物，即HbA1c。
整個糖化過程非常緩慢，HbA1c與血糖達到平衡可能需要幾周時間。因此當(dāng)血糖在短期內(nèi)迅速升高，例如在進展迅速的1型糖尿病患者中，HbA1c不能真實反映急性血糖變化情況，測定結(jié)果假性偏低。
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吳學(xué)兵等人發(fā)現(xiàn)，貧血標(biāo)本由于放置時間過長導(dǎo)致標(biāo)本未充分混勻可引起HbA1c假性降低或升高，原因可能是貧血標(biāo)本由于血細胞壓積較低且通常伴有嚴重感染造成血沉加快，導(dǎo)致儀器吸樣量不足，吸取紅細胞濃度不足，出現(xiàn)非典型基線斜升圖譜，從而 HbA1c 檢測假性降低。
雷諾華公司生產(chǎn)的全自動糖化血紅蛋白分析儀，具有HGB濃度檢測模塊，可確保被測樣本的總面積保持在相對穩(wěn)定的范圍內(nèi)，從而有效避免樣本沉淀分層、貧血樣本或HGB濃度過高等帶來的影響。
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多見于血液疾病，例如地中海貧血會導(dǎo)致患者紅細胞壽命縮短，加上血紅蛋白變異體的影響容易引起HbA1c假性降低。同時地中海貧血患者由于珠蛋白的缺失，使得血紅蛋白的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，導(dǎo)致糖化受阻，也會引起HbA1c假性減低。
在臨床工作中，除了根據(jù)HPLC儀器圖譜特點設(shè)置攔截規(guī)則從而及時識別異常血紅蛋白以外，我們還需要特別注意HbA1c水平是否與其臨床診斷矛盾，尤其需要關(guān)注異常低值（<4.0%）和異常高值（>18.0%）。
在有干擾因素存在而無法通過HbA1c獲得準(zhǔn)確血糖信息的情況下，我們需要及時與臨床進行溝通為其提供準(zhǔn)確的報告以及合理的結(jié)果解釋，可使用HPLC之外的方法學(xué)復(fù)測HbA1c，如硼酸親和色譜法、電泳法等，從而了解到患者真實的血糖控制水平。
